�(xì)胞內(nèi)�pH的變化在生理和病理過程中扮演著很重要角色,細(xì)胞內(nèi)pH的變化會容易誘導(dǎo)�(xì)胞分�、快速生長和功能的失�(diào)。細(xì)胞外pH變小呈酸性是癌變以及其它病變的一個重要信號。對�(xì)胞內(nèi)外不同區(qū)�pH的檢測有助于對細(xì)胞生命過程以及病理機制的研究�
ANNA是一個理想的比率�pH熒光探針:
l 靈敏度高�ANNA的吸收和�(fā)射光譜在生理pH范圍�(nèi)�pH 6-8),并且在酸性和堿性狀�(tài)下都有很高的熒光量子�(chǎn)��
l 反應(yīng)性好�ANNA的羧基可以偶�(lián)其它各種生物分子、藥物分子或微納材料,而其pH響應(yīng)功能不受影響。因��ANNA�pH響應(yīng)是來自于4H-1,2,4-三氮�(1,5-a)二氮雜環(huán)-1,8-萘酰亞胺�(jié)�(gòu),且熒光信號不隨酰亞�N-取代基的改變而改��
l �(chǎn)品穩(wěn)定:�pH響應(yīng)具有良好的可逆�,可以長時間反復(fù)使用,對�、空氣等非常�(wěn)定;
l 抗干擾能力強,適用范圍廣:離子強度對熒光團不�(chǎn)生干�,可用于�(xì)�、動物復(fù)雜生物體��[1-3]
�(chǎn)品編�
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�(chǎn)�名稱
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簡稱
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CAS
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�(jié)�(gòu)�
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2668726
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N-己酸�-4H-1,2,4-三氮�(1,5-a)二氮雜環(huán)-1,8-萘酰亞胺
3,9-Dihydro-1,3-dioxopyrido[3,4,5-gh][1,2,4]triazolo[1,5-a]perimidine-2(1h)-hexanoic acid
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ANNA
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1359819-97-8
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n �(chǎn)品使用說�
1)細(xì)胞在成像的前置于直徑�20mm的玻璃基底細(xì)胞培�(yǎng)皿(MatTek Co.)培�(yǎng)24h�
2)將pH探針ANNA�4 mM)與�(xì)胞在�(xì)胞培�(yǎng)基中孵育1-2h�
3)用PBS緩沖液(pH=7.4)洗�(xì)胞三�,去除游離的探針�
4)細(xì)胞成像用100倍共聚焦顯微鏡觀�。激�(fā)波長�405nm�488nm,熒光信號收�1通道425-475 nm�2通道500-600 nm的熒光強�。(如配�455nm激光器:可直接�455nm激�(fā),收�1通道�470nm-500nm)和2通道�505nm-540nm)熒光強度)
5�pH�(biāo)�(zhǔn)曲線:用1mL�5 ug /mL nigericin(一種運載鉀離子和氫離子的載體,能夠使細(xì)胞內(nèi)外的pH快速的�(dá)到一致)的不�pH的高K+ HEPES緩沖液處理細(xì)�10min� �K+ HEPES緩沖液含�125 mM KCl, 20 mM NaCl, 0.5 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, 5 mM 葡萄糖和20 mM HEPES。然后�(jìn)行細(xì)胞成�� 根據(jù)I2通道/I1通道�pH的關(guān)系繪制曲�,將待測樣品比值帶入標(biāo)�(zhǔn)曲線,獲得實際細(xì)胞內(nèi)外的pH�
n 更多熒光探針�(chǎn)�
�(chǎn)品編�
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�(chǎn)�名稱
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CAS
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�(jié)�(gòu)�
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2668725
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2,6-雙(2-�3,3-二甲�-1-丙基-二氫吲哚-2-亞基)亞乙基�-�(huán)己酮
2,6-Bi(2-(3,3-dimethyl-1-propylindolin-2-ylidene)ethylidene)-cyclohexanone
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1442645-34-2
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.bmp)
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2668724
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2,9-�[4-�4-甲基哌嗪-1-基)苯乙烯基]-1,10-菲咯�
2,9-Bis[4-(4-methylpi-perazin-1-yl)styryl]-1,10-phenanthroline
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1792998-33-4
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.bmp)
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2668727
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CSTS
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N/A
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.bmp)
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433521
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D-熒光素鉀�
D-Luciferin potassium salt
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115144-35-9
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.bmp)
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102273
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2,3-二氨基萘
2,3-Diaminonaphthalene
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771-97-1
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.bmp)
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2668723
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9-甲基-3,6-�[5-�4-甲基哌嗪-1-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-�] -9H-咔唑
9-Methyl-3,6-bis[5-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzo[d]imidazol-2-yl]-9H-carbazole
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1514901-89-3
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.bmp)
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227585
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鄰苯二甲�
o-Phthalaldehyde
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643-79-8
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.bmp)
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n 相關(guān)文獻(xiàn)
[1] Zhou, J., Fang, C.L., Chang, T.J., Liu, X.J. and Shangguan, D. A pH sensitive ratiometric fluorophore and its application for monitoring the intracellular and extracellular pHs simultaneously. J Mater Chem B, 1, 661-667 (2013).
[2] Hou, Y., Zhou, J., Gao, Z., Sun, X., Liu, C., Shangguan, D., Yang, W. and Gao, M. Protease-activated ratiometric fluorescent probe for pH mapping of malignant tumors. ACS nano, 9, 3199-3205 (2015).
[3] Ma, T., Hou, Y., Zeng, J., Liu, C., Zhang, P., Jing, L., Shangguan, D. and Gao, M. Dual-Ratiometric Target-Triggered Fluorescent Probe for Simultaneous Quantitative Visualization of Tumor Microenvironment Protease Activity and pH in Vivo. J Am Chem Soc (2017).
n 相關(guān)�(chǎn)�